0　前言 油料種子的脂肪含量是決定其品質(zhì)的重要指標(biāo) 之一,也直接影響到油料的價格。測定脂肪含量的 方法很多,其中最傳統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)測定方法是索氏抽提 法,但該法操作費時費力,不能滿足快速測定的要 求。FAFA 比傳統(tǒng)的索氏抽提法更加快捷安全,經(jīng)濟(jì) 可靠,已成為糧油脂肪測定的一種重要工具。但該 儀器在最主要的油料作物大豆的脂肪測定中,測定 方法很不統(tǒng)一,因大豆的脂肪含量高,一些用戶為了 追求結(jié)果的可靠,在操作中盲目延長抽提時間,使該 儀器的潛能沒有充分發(fā)揮出來。FAFA 在大豆脂肪 測定中影響因素很多,如浸提溶劑、浸提溶劑的體 積、溫度、浸泡時間、抽提時間、粉碎粒度等。該實驗 使用的溶劑為石油醚( 30℃～ 60℃) ,加熱板溫度為 135℃,浸提溶劑為 70 ～ 90mL,這是由儀器本身的設(shè) 計工藝所決定的,較高的加熱板溫度會提高溶劑回 流速度,但溫度過高,溶劑容易暴沸,〗甚至有爆炸的危險,溶劑體積過多或過少也會直接影響回流效果, 對于FAFA,80mL 左右的溶劑量回流效果最佳。 該文側(cè)重探討在FAFA 的使用中,粉碎粒度、浸 泡時間、抽提時間對大豆脂肪測定結(jié)果的影響。 

1　材料與方法 

1. 1　實驗材料 美國 2#大豆; 黑龍江大豆。(樣品冷藏于 4℃ 冰箱中,現(xiàn)用現(xiàn)磨) 

1. 2　儀器用具 Perten 3100 實 驗 磨:轉(zhuǎn) 速 16800r/min , 篩 網(wǎng) 0. 8mm; JFSD-100粉碎機(jī); 上海嘉定糧油檢測儀器廠; SZC-101自動脂肪測定儀:上海纖檢儀器有限公司; 分析天平: Mettler Toledo ME204,精度 0. 0001g; 索氏脂肪抽提器: 天津市玻璃儀器廠; 電熱恒溫水浴鍋: 天津中環(huán)實驗儀器有限公司; 數(shù)顯式電熱恒溫干燥箱: 上海陽光實驗儀器有 限公司; 備有變色硅膠的干燥器; 海爾冰箱。

1. 3 　試劑 石油醚( 30℃～ 60℃) ,分析純,天津市天河化學(xué) 試劑廠。 

1. 4 　測定方法 

1. 4. 1 　國標(biāo)法 　大豆脂肪的測定方法按 GB/T 14488. 1-93 執(zhí)行。 

1. 4 . 2　FAFA 法 

1. 4. 2. 1　樣品制備　取除凈雜質(zhì)的樣品 30 ～ 50g, 粉碎后裝入廣口瓶中備用。 

1. 4. 2 . 2　準(zhǔn)備浸提燒杯　將浸提杯放于 105 ℃烘箱 中烘 1h, 取出, 置于干燥器中冷卻后稱量,精確至 0. 001g。 

1. 4 . 2. 3　樣品干燥　從備用樣品中,用濾紙筒稱取 試樣 3～ 5g,精確至 0. 001g。放入 105℃烘箱干燥 30min,然后將濾紙筒安裝到 2050脂肪測定儀上。 

1. 4. 2 . 4　儀器操作　將稱量好浸提燒杯通過杯支 架放到浸提裝置上,降下冷卻器的高度。用溶劑添 加筒通過連接分配器向每個杯子中加入 80mL 石油 醚( 30℃～ 60℃)。打開冷凝水,在儀器控制裝置上 設(shè)置好所需程序并按啟動鍵,儀器按所需程序進(jìn)行 浸泡、抽提和溶劑回收。 

1. 4. 2 . 5　干燥　將浸提燒杯與提取物放入 105℃烘 箱中,30min 后取出放入干燥器,冷卻稱重。 

1. 4 . 2. 6　計算　脂肪(濕基)%= ( m2-m1) ( 100-M標(biāo)水)×100/m( 100-M) m2 —干燥后抽提物與浸提燒杯的質(zhì)量,g; m1 —浸提燒杯的質(zhì)量,g; m—試樣的質(zhì)量,g; M標(biāo)水 —標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定水分百分?jǐn)?shù),即每百克樣品中含水 分克數(shù),g。 M—每百克試樣中含水分克數(shù),g。 

1. 4 . 3　結(jié)果處理　所有實驗做雙實驗,如雙實驗結(jié) 果之差不超過 0. 4%,則取兩次測定的算術(shù)平均值 為測定結(jié)果。如果雙實驗結(jié)果之差超過 0. 4%,則 另取兩份試樣進(jìn)行測定。如測定結(jié)果仍超過0. 4%, 而前兩次測定平均值與后兩次測定值之差不超過 0. 4 %,則取四次測定的平均值作為測定結(jié)果。 

1. 5 　實驗步驟 

1. 5 . 1　按國標(biāo)法對兩種大豆樣品進(jìn)行脂肪測定,并 測定其水分含量。 

1. 5. 2 　粉碎粒度的影響　將黑龍江大豆分別用 Perten 3100 實驗?zāi)ァ⑸虾＜味?JFSD -100 粉碎機(jī) ( 1. 0mm篩網(wǎng)、1. 5mm 篩網(wǎng)、2. 0mm 篩網(wǎng))粉碎,粉碎后樣品裝入廣口瓶中。用 FAFA 測定脂肪,比較不 同粉碎粒度對測定結(jié)果的影響。 1. 5. 3　不同浸泡時間與抽提時間(以下簡稱浸提) 對測定結(jié)果的影響　大豆樣品經(jīng) Perten 3100實驗?zāi)?粉碎后,用自動脂肪測定儀測定其不同浸提時間的 脂肪含量,以確定最佳浸提時間。實驗中,浸泡時間 分別設(shè)定為 15min、30min、60min、90min ; 抽提時間分 別設(shè)定為 30min、60min 、90min、120min。浸泡時間為 30min 時, 另增加抽提時間為 45 min 、75 min、105 min、 180 min、240 min 的脂肪測定實驗,以驗證實驗 結(jié)果的可靠性。 

2　結(jié)果與分析 

2. 1　國標(biāo)法測大豆脂肪含量

2. 2　FAFA 法的影響因素 

2. 2. 1　粉碎粒度的影響 從表2 中可見,Perten 3100實驗?zāi)ケ?JFSD-100 普通粉碎機(jī)制備的樣品浸提效果要好。粒度的大小 直接影響浸提的效果,粒度越小,脂肪測定所需時間 越短。粒度越大,測定所需時間越長,結(jié)果也偏低。 

2. 2. 2　浸泡時間對測定結(jié)果的影響

從表 3～ 6 中可以看出,浸泡時間的長短對測定 結(jié)果的影響并不明顯,浸泡的目的就是讓樣品中的 油脂擴(kuò)散到溶劑中,在抽提過程中,油脂就可以順利 地從試樣中分離出來。用 FOSS2050 自動脂肪測定 儀測定大豆脂肪含量,浸泡時間為 30min 可以滿足 實驗的要求,過多地延長浸泡時間沒有太多的意義。

 2. 2 . 3　抽提時間對測定結(jié)果的影響

表7 ～ 10可以看出,抽提時間越長,樣品中油脂 的提取越充分,但隨著時間的延長,其影響會越來越 小。因經(jīng)過一定時間的浸提,樣品中的脂肪已經(jīng)被 充分提取,抽提時間達(dá)到 60min 以后時,測定結(jié)果基 本不變。

3　討論 實驗表明,用 FAFA 測定大豆脂肪含量,粒度越 小,脂肪浸提越容易,因粒度小的物料有較大的有效 表面積,便于脂肪浸提,Perten 3100 實驗?zāi)タ梢垣@得 較小的粉碎粒度,能夠滿足實驗要求。 足夠長的浸提時間,可以得到與國標(biāo)法相同的 結(jié)果,但在實際工作中, 在保證獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)的同 時,時間要越短越好。大豆樣品用 Perten 3100 實驗 磨粉碎后,用 FAFA 測定脂肪含量,用石油醚( 30℃ ～ 60℃)做溶劑,浸泡時間設(shè)置為30min,抽提時間設(shè) 置為 60min ,就可以取得與國標(biāo)法相同的結(jié)果。傳 統(tǒng)的索氏抽提法測定大豆脂肪需 10h 以上時間,而 FOSS2050 自動脂肪測定儀進(jìn)行提取僅需 3h,縮短了 測定時間,提高了工作效率。