索氏抽提法適用范圍較廣，可用于肉制品、豆制 品、谷物、堅果、油炸果品、中西式糕點等樣品中粗脂 肪含量的測定。我們采用此法，在2005年3月參加了由 國家實驗室認可委員會（CNAL）組織的能力驗證考 核，按《CNAL T0186大豆中營養成分檢測能力驗證方 案》的要求（以下簡稱《驗證方案》），對國家標準物 質研究中心發放的考核樣品進行分析測定工作。經仔細 試驗和研究索氏抽提法的全過程，針對有可能影響最終 檢測結果準確度和重復性的問題，我們采取一些改進技 術措施，完善實驗操作，取得較好的效果。

1 索氏抽提法分析中存在的不明確之處

因《驗證方案》對考核樣品的測定結果準確度有很 高要求，我們進行了慎重的預實驗。在實驗過程中發 現，索氏抽提法中有多處列出的分析步驟，沒有規定具 體操作方式或相關參數，甚至有不妥之處（下文在括弧 內注明存在的問題），實際操作中難于把握具體細節， 有一定的隨意性，對檢測結果有較大影響。 1.1 試樣處理 準確稱取樣品2.00～5.00g，必要時（未注明何種情 況為必要）拌以海砂，全部移入濾紙筒內（未注明制作 濾紙筒的具體要求和尺寸，應該多大為適用）。 1.2 抽提取 將濾紙筒放入脂肪抽提器的抽提筒內，連接已干燥 至恒重的接收瓶，由抽取器冷凝管上端加入（此操作法 不妥）無水乙醚或石油醚至瓶內容積的2/3處，于水浴

上加熱（導熱方式不妥及未注明加熱溫度），使乙醚或 石油醚不斷回流提取，回流速度為6～8次/h，一般需抽 提6h～12h。 1.3 稱量測定 取下接收瓶，回收乙醚或石油醚，待接收瓶內乙醚 剩1～2ml時在水浴上蒸干（仍為導熱方式不妥及未注明 加熱溫度），再于100±5℃干燥2h。放置于干燥器內冷 卻0.5h后稱量。重復以上操作直至恒重。

2 實驗技術研究及改進

2.1 加入海砂的量與方法 加入海砂的目的是使樣品保持膨松狀，在抽提時不 結塊，使乙醚能夠順暢進入樣品內部與其充分接觸，提 高回流抽提量，并易于進行下一步往濾紙筒轉移的操 作，適用對象為粉末狀樣品。本次大豆粉考核樣研磨得 較細，必須加入適量海砂混勻，保證轉移和抽提完全， 否則會出現測定結果偏低的可能性。經試驗加入量以與 樣品體積比例1：1為宜，可使大豆粉樣品疏松通透，操 作要點為加入時應充分攪拌均勻。

 2.2 濾紙筒的制作 濾紙筒制作尺寸主要考慮以下幾個因素：（1）濾 紙不宜過小。折疊成筒狀時重疊部分較少，抽提時樣品 容易從接頭處漏失。（2）濾紙不宜過大。折疊成濾紙 筒時會使重疊部分過多過厚，阻礙抽提液順暢流經樣 品，降低抽提效率。（3）特別要注意與實驗器皿尺寸 相匹配。濾紙筒的直徑應與抽提瓶內徑一致，偏大則不易將濾紙筒放入抽提瓶，硬性推入可能造成濾紙筒破裂。 偏小則會使濾紙筒漂浮于抽提液中，隨抽提液升降，濾紙 筒浮于液面之上的部分，抽提效果將受影響。因此，我們 選擇Φ18cm定量濾紙制作濾紙筒，將下端向上折疊2cm。 既保證抽濾時速度適中樣品不損失，又使濾紙折疊成筒狀 時有足夠適宜的重疊部分，不會使樣品從接縫處漏出或者 阻礙抽提液滲透流通。操作時必須注意：樣品在倒入時不 得進入重疊部分的外層。濾紙筒放入抽提瓶底，用潔凈玻 璃棒或吸管將濾紙筒上端輕輕壓下成封閉狀，但要注意不 要壓得太緊，高度與回流管（細管下沿）齊平。 

2.3 抽提劑乙醚的加入方法 本次實驗采用無水乙醚為抽提劑，加入無水乙醚 時，不能按1.2的方法直接從冷凝器上端加入。這樣操作 加入的乙醚向下流淌速度太快，將順冷凝管直接沖滴到 濾紙筒上，會使樣品從濾紙筒中滲出，抽提瓶中出現混 濁。我們對此作了改進，具體的做法是將乙醚直接倒入 接收瓶內至2/3處，避免了抽提劑直接沖擊包有樣品的 濾紙筒，從而減少樣品損失。 

2.4 水浴加熱的導熱方式及加熱溫度 我們通過對實驗全過程的觀察分析，認為采用常規 的水浴加熱方式是不妥當的。原因為：該方法的最終測定 手段是對接收瓶恒重，稱量其增重（即樣品重量），精確 至萬分之一克。因此除樣品本身外，其它能使接收瓶改變 重量的因素均應排除。而將接收瓶直接浸入恒溫熱水中， 難于避免水中雜質結附于瓶底（如水垢等），特別是類似 本次實驗這樣加熱時間長的情況就更加嚴重。因此，我們 采用降低水浴鍋中的水位，將接收瓶架于水浴鍋墊圈上的 辦法，改為以蒸氣為熱媒介質進行加熱，確保接收瓶底不 接觸加熱水。為滿足乙醚不斷回流抽提（6～8次/h）的要 求，經多次試驗，水浴溫度控制在75～80℃為宜。 

2.5 其它注意事項 （1）對于檢測質量要求高的樣品，正式開始測定前 應做好預實驗，初步了解樣品中脂肪含量的范圍，估算適 合的取樣量，取樣量不宜太少，否則測定精密度較差。 （2）接收瓶中最終結果呈現的應該是澄清透明的油 狀物，若是出現混濁狀或有少量沉淀物，都表明樣品有滲 漏現象。如果發生這種情況，必須重新進行樣品的檢測。 （3）回流時間以有冷凝后的乙醚滴下開始記時， 全程共7.0h。 （4）恒重接收瓶、樣品時，控制干燥箱的溫度為 100±3℃，2h，在干燥器中冷卻0.5h后稱重。特別強調 每次稱量的時間間隔要控制準確一致。（5）注意天平室的溫度、濕度在各次稱量時應基 本保持一致，便于稱量達到恒重結果。 （6）在整個實驗操作過程中，應配戴一次性PVC 手套，避免手對接收瓶外壁的沾污，造成結果偏重，形 成正誤差。 （7）有條件時應帶質控樣同時分析，檢驗實驗的 系統誤差，保證測定準確度。

3 考核樣檢測結果

按《驗證方案》對考核樣品的測定要求，采用以上 改進完善后的方法，測定CNAL T0186大豆考核樣中脂 肪含量，測定5個平行樣取平均值。數據準確度高(︱Z︳ ≤ 2 )，精密度好（A樣：RSD＝3.64%；B樣：RSD＝ 0.78%），獲得了滿意的結果。實驗測定結果見表1

檢測完成后，及時整理了實驗數據，按時將全部資 料上報。根據國家實驗室認可委員會（CNAL）反饋的 考核評審結論，本次對考核樣檢測的數據準確可靠，取 得滿意結果(見表2)。

4 結論

采用前述經改進的實驗技術，可以很好地完善索氏 抽提法，使實驗過程更為科學合理，從而獲得高質量的 檢測結果。