粗脂肪含量是糧食 、 油料、 飼料等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中重要質(zhì)量 指標(biāo) , 是評(píng)價(jià)產(chǎn)品品質(zhì) , 組織生產(chǎn)的重要依據(jù)之一。 國(guó)內(nèi)外 測(cè)定粗脂肪含量方法有十余種之多 , 索氏抽提法是自前應(yīng)用 最廣泛測(cè)定方法 , 是公認(rèn)的脂肪含量測(cè)定的經(jīng)典方法。 在實(shí) 際工作中, 此法存在的問(wèn)題主要是抽提時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和抽提結(jié)束 后抽提瓶不易恒重。 圍繞這些問(wèn)題 , 對(duì)抽提過(guò)程和抽提前后 采用的處理手段進(jìn)行改進(jìn) , 以國(guó)標(biāo)方法為參照 , 熱浸提一油 重法和殘余法為改進(jìn)方法 , 對(duì)照 比較這三種檢測(cè)方法的測(cè)定 結(jié)果。 1 方法原理 經(jīng)典索氏提取法測(cè)定脂肪是將樣品放在抽提筒內(nèi) , 以 水浴蒸餾冷凝的乙醚進(jìn)行回流浸提 , 一般要十幾小時(shí)。 熱 浸提一油重法 由于樣品處于高溫溶劑中 , 分子運(yùn) 動(dòng)加快 , 使 脂肪浸出速度加快 , 因而大大地縮短浸提時(shí)間 , 從而加快測(cè) 定速度 , 一般完成樣品的整個(gè)提取過(guò)程不到 2 小時(shí)。 鋁杯 代替玻璃瓶 , 電熱板代替水浴加熱, 抽提杯容易恒重 , 而且 抽提杯不易被污染 , 操作簡(jiǎn)單容易。 殘余法不 同之處在于 采用抽 提過(guò)脂肪的殘余物質(zhì)量計(jì)算脂肪含量 , 較以前的殘 渣法改進(jìn)之處在于不需恒重紙袋質(zhì)量 , 在電子天 平上稱出 試樣質(zhì)量 , 抽提前后 樣品質(zhì)量差為浸 出脂肪量。 測(cè)得結(jié)果 為原 樣脂肪含量 , 不是干基脂肪含量 , 與國(guó)標(biāo)法測(cè)得結(jié)果 一 致。
2 檢測(cè)方法 .2 1 試劑 分析純無(wú)水乙醚或沸程為 3 0 ` 6 0 石油醚。
2.2 儀器 索氏脂肪提取器 ; F 0 s S 2 05 5 型脂肪測(cè)定儀 ; 電子天平
2.3 式樣制備 選取具有代表性樣品 20 0 9, 粉碎后全部通過(guò) 6 0 目篩 , 裝于密封容器中 , 防止試樣成分變化。
2.4 分析步驟
2 .4 1 國(guó)標(biāo)法 按 G B / T 5 5 1 2 食品中脂肪測(cè)定方法或 G B / T 643 3 飼料
粗脂肪測(cè)定方法進(jìn)行檢測(cè)。 為使抽提終點(diǎn)有一量化概念 , 消 除不同人員目測(cè)產(chǎn)生差異 , 同時(shí)避免檢查抽提終點(diǎn)時(shí)乙醚大 量揮發(fā)損害檢驗(yàn)人員健康。 采取同時(shí)平行測(cè)定 6 個(gè)樣品 8 小時(shí)后取出一個(gè)抽提瓶 , 以后每隔2 小時(shí)取出一個(gè) , 直到樣 品脂肪含量不再增加為止。 測(cè)出不同類別樣品需要的抽提 時(shí)間 , 可作為日常工作參照 , 也是改進(jìn)法實(shí)驗(yàn)條件確定依據(jù) 之一。 部分樣品測(cè)定脂肪需要的抽提時(shí)間見(jiàn)表 1。
2 .4 2 熱浸提一油 重法 稱樣 l 一 5 9 (M ) 于濾紙筒中 ,烘干 , 把濾紙筒放到脂肪測(cè) 定儀中。 鋁杯在 10 5 ℃士 2℃條件下恒重 (M )I , 放到儀器加熱 板上 , 壓下儀器連接手柄, 使鋁杯與回流器緊密連接 , 從加液孔加入 乙醚 8 0 m l, 接通冷凝水。 視脂肪含量設(shè)定儀器條件為: 加 熱溫 度 1 3 5℃ , 時(shí) 間: 浸提 3 0 面n 一 9 0 m in , 淋 洗
3 0 im n , 試劑回收 1 0 m i n , 蒸干 5 m io n 取下鋁杯 , 1 0 5℃士 2℃ 烘箱中干燥 3 0 而n , 在干燥器中冷卻 , 稱重 (M o z ) 脂肪含量 =( M2 一 M ,) X 100 /M. 2 .4 3 殘?jiān)?稱 取式樣 2 9 (M ) (準(zhǔn) 確至·. 0 0 00 2 9 ), 用 濾紙 包好 ,1 0 5℃ 士 2℃烘箱中干燥 3 h 取出 , 在干燥器中冷卻 , 稱重(M ) I。 將樣包裝入索氏脂肪抽提器抽提筒中 , 再倒入無(wú)水乙 醚 , 乙醚高度為完全浸泡樣包 , 連接好儀器各部分 , 浸泡至少1 6 h。 將浸泡后無(wú)水乙醚放入抽提瓶中 , 在抽提瓶中放入兒 粒玻璃球 , 然后 , 抽提筒 中重新倒入無(wú)水乙醚使之完全浸泡樣 包 , 連接好儀器各部分 , 接通冷凝水 , 在 6 0 ℃ 一 7 5 ℃ 水浴上加 熱, 使乙醚回流, 控制乙醚回流次數(shù)為每小時(shí) 8 次。 一般抽提 6 h 一s h。 抽提完畢 , 取出樣包 , 置樣包于通風(fēng)處使乙醚揮 發(fā)。 將樣包放入 10 5 ℃士 2℃ 烘箱中干燥 Z h , 取 出, 在干燥器 中冷卻 , 稱重 (M Z)。 脂肪含量 = (M l一 M勻X l oo / M 3 結(jié)果分析
1 ) 樣品選取脂肪含量 高的花生、 脂肪含量中等的魚(yú)粉 和脂肪含量較低的玉米 , 采用熱浸提一油重法和殘?jiān)ǚ謩e 測(cè)定 , 結(jié)果重 復(fù)性見(jiàn)表 2。 從表 2 數(shù)據(jù)看出 , 兩種測(cè)定方法 重現(xiàn)性都較好。
2 ) 選取一組樣品分別用三種方法測(cè)定樣品脂肪含量 , 取 5 次測(cè)定結(jié)果平均值為最終結(jié)果進(jìn)行比較 , 數(shù)據(jù)見(jiàn)表 o 3 兩種測(cè)定結(jié)果與國(guó)標(biāo)法相比, 無(wú)顯著性差異 (P > . 0 0 5 ) 。
(3 ) 為確定兩種檢測(cè)方法的有效性和可比性 , 與其它實(shí) 驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較 , 結(jié)果見(jiàn)表 4 o 絕對(duì)差均小于 .0 5% , 相對(duì)偏 差 最高為 3 . 6% , 符合標(biāo)準(zhǔn) G B / T 6 4 3 3 一 19 9 4 、 G B / T55 1 2 8 5 不同實(shí)驗(yàn)室 間重復(fù)性要求。
4 結(jié)論
( 1 ) 國(guó)標(biāo)法、 熱浸提一油重法和殘余法均具有良好重現(xiàn) 性和準(zhǔn)確度 , 說(shuō)明兩種改進(jìn)方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠 , 一 定條 件下 三種方法可以相互代替使用。
( 2 ) 熱浸提一油重法優(yōu)勢(shì)在于利用脂肪測(cè)定儀使試樣 浸入沸騰的溶劑中 , 使脂肪迅速進(jìn)入溶劑中。 所以樣品不 同
只 需改變浸提時(shí)間 , 淋洗時(shí)間改變沒(méi)有浸提時(shí)間改變影響 大。 3 0 m i n 淋洗時(shí)間足以使脂肪完全洗脫。
( 3 ) 殘余法浸泡時(shí)間可 利用 晚上 時(shí)間, 由于不 加熱 回 流 , 不必守護(hù) , 不占用工作日。 回流時(shí)間可參照表 1 進(jìn)行調(diào)
整。 外加的脂肪如方便面等油炸食品 , 雖 含量高 , 但脂肪容 易浸出 , 浸泡后回流 2 一3 小時(shí)即可提取完全。
( 4 ) 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意稱量 的重要性 , 天平室環(huán)境條件 除滿足一 般要求外 , 相對(duì)濕度應(yīng)控制 在 4 5 % 以下。 在此條 件下濾紙包烘 2 小時(shí)即達(dá)到恒重要求 , 不必復(fù)烘。 鋁杯在整個(gè)抽提過(guò)程一 直處于 13 5 ℃環(huán)境中 , 只需烘 3 0 m i n 即達(dá)到 恒重要求。 與國(guó)際法相比 , 節(jié)約恒重所需大量時(shí) 間, 簡(jiǎn)化實(shí) 驗(yàn)操作 。
(5 ) 脂肪測(cè)定儀 同時(shí)可測(cè)定 6 個(gè)試樣 , 在 1 個(gè)工作 日內(nèi) 可 完成檢測(cè) , 實(shí)現(xiàn)脂肪快速、 準(zhǔn)確測(cè)定。 能滿足 日常生產(chǎn)和 商貿(mào)交易 中對(duì)脂肪含量測(cè)定要求。 殘余法在一 套提取器 內(nèi) 可 同時(shí)放置多個(gè)濾紙包 , 同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品 , 顯著提高工作 效率 , 節(jié)省水、 電和試劑。 殘余法對(duì)大批量樣品脂肪檢測(cè)更 能顯現(xiàn)其優(yōu)越性 , 如糧食、 油料品種篩選 , 市場(chǎng)商品質(zhì)量普查 等工作中脂肪含量測(cè)定。
( 6 ) 國(guó)標(biāo)法盡管費(fèi)時(shí)間 , 但仍是普遍使用方法。 三種方 法相互驗(yàn)證起到日常檢測(cè)質(zhì)量的控制作用。 脂肪檢驗(yàn)要求 認(rèn)真細(xì)致 , 一旦忽視某個(gè)細(xì)節(jié) , 都會(huì)造成實(shí)驗(yàn)失敗。
